黄曲霉毒素是一类主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌相互作用产生的次级代谢产物，包括黄曲霉毒素B1(AFB1）、黄曲霉毒素B2(AFB2）、黄曲霉毒素G1(AFG1）、黄曲霉毒素G2(AFG2）、黄曲霉毒素M1(AFM1）、黄曲霉毒素M2(AFM2）等，中药材中主要含有AFB1、AFB2、AFG1、AFG24种，其中AFB1因其致癌、致畸、致毒性较强被国际癌症研究机构（IARC）列为Ⅰ级强致癌物。
由于中药基质复杂，以决明子为例，如果按照药典方法单独使用免疫亲和柱净化，决明子的基质抑制效应较大，易造成低浓度目标物无法检出，从而不能对其中的黄曲霉毒素含量进行准确测定。
因此，美正针对中药材中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2的检测推出了新的整体解决方案。
本实验过程采用净化柱结合黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫亲和柱方式进行除杂净化，可有效降低基质效应的影响，且结果稳定，减少了对仪器设备和色谱柱的污染，为客户提供了更高效的处理方法。
方法摘要
本实验采用净化柱结合黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫亲和柱建立了决明子中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2的前处理方法。样品经甲醇溶液提取，净化柱除杂，再通过黄曲霉毒素免疫亲和柱净化富集，LC-MS/MS检测，外标法进行定量。结果表明，当黄曲霉毒素B1/G1添加量为5 μg/kg，黄曲霉毒素B2/G2添加量为1.5 μg/kg时，黄曲霉毒素的回收率均在90% ~ 120%。
实验流程
色谱条件
色谱柱：五氟苯基键合色谱柱（或其他等效色谱柱），2.6 µm，3.0 × 50 mm；
流动相A：10 mmol/L乙酸铵；
流动相B：甲醇；
柱 温：40℃；
进样量：10 µL；
梯度洗脱：
液相色谱梯度洗脱条件
质谱条件
离子源：ESI+；
雾化气：200；
电喷雾电压：4500 V；
离子源温度：275℃；
反吹气：80；
质谱接口温度：250℃；
采集方式：多反应监测(MRM)。
质谱参数
实验结果
决明子基质加标回收实验结果
决明子基质5 μg/kg加标色谱图（以AFT B1计）
结论
美正使用净化柱结合黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫亲和柱建立了决明子中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2的前处理方法，并对加标量为5 μg/kg的决明子样品进行了检测。
结果表明，先用净化柱除杂，再使用黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫亲和柱进行处理，黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2回收率满足要求且变异系数小于15%。
如果直接使用药典方法，基质效应较大，因此使用净化柱除杂后再通过免疫亲和柱净化，可有效降低基质效应影响，减少仪器设备和色谱柱的污染，更适用于在液相色谱串联质谱上检测决明子中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2，且方法稳定。
附：相关产品
